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编号:13834865
维生素K3对光老化HaCaT细胞保护作用的研究(2)
http://www.100md.com 2020年6月15日 《中国美容医学》 202012
     1 材料和方法

    1.1 试剂与仪器:维生素K3(美国Sigma公司);DMEM培养基(美国Gibco公司);胎牛血清(杭州四季青生物工程材料有限公司);CCK-8试剂盒(日本同仁有限公司);倒置荧光显微镜(美国赛默飞公司),兔抗人β-actin单克隆抗体(Abcam公司);兔抗人COX2单克隆抗体(Abcam公司);兔抗人MMP1单克隆抗体(Abcam公司);兔抗人LC3B单克隆抗体(Abcam公司);手提UVA紫外灯(徐州科诺公司)。Vit K3以二甲基亚砜(DMSO)配制成浓度为100mM的母液(DMSO浓度≤2‰)保存,使用时用DMEM培养基稀释至工作浓度,现配现用。

    1.2 细胞培養及实验分组:HaCaT细胞株(上海复祥生物科技有限公司)。将处于对数生长期的HaCaT细胞消化、计数。以8×103个/孔将细胞接种至96孔板,每组6个复孔,于37℃、5% CO2培养箱过夜。运用CCK8法测出Vit K3对细胞的最大无毒浓度,在此浓度之下预实验,最终分为5组 ......
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